一种人副流感1型HN重组蛋白的制备及应用

王 敏1, 周 同喜1, 徐 延伟1, 千 新来2
1、郑州伊美诺生物技术有限公司
2、新乡医学院

摘要


目的：利用昆虫杆状病毒表达系统制备HPIV1型HN重组蛋白，用于临床血清特异性抗体检测或副流感病
毒感染诊断。方法：将优化后的HN序列插入pFastBac1载体，获得重组质粒pFastBac-HN，并转染细胞表达。通过
Ni Excel亲和层析纯化目的蛋白，并与辣根过氧化物酶偶联后检测血清特异性抗体。结果：测序显示HN基因成功插
入pFastBac载体，电泳结果显示53KD处有明显条带，与预期一致；纯化蛋白纯度>95%。电泳与SEC-HPLC分析表
明蛋白稳定性良好。HN抗原与辣根过氧化物酶交联后，间接法检测阴阳反差>90，热加速14天后稳定性变化在8%
以内。结论：成功制备HPIV1-HN重组蛋白，并成功应用于1型副流感阳性样本的IgM检测。

关键词


HPIVs；HN；昆虫杆状病毒表达；蛋白纯化

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