胡椒碱脂质体对大鼠骨髓间充质干细胞的促成骨分化作用研究

李 瑜, 胡 晓佳, 冯 洁, 王 玥, 贠 洁, 马怀 芬*
西安培华学院

摘要


目的：探讨胡椒碱脂质体对大鼠骨髓间充质干细胞的促成骨分化作用的影响。方法：胰蛋白酶消化法分离提取培养原代大鼠骨髓间充质干细胞，CCK-8法检测系列浓度PIP（0.005 μM、0.05 μM，0.5 μM，5 μM，50 μM，250 μM、500 μM）对大鼠BMSC细胞活力的影响，确定最适浓度后，与卵磷脂/胆固醇制备胡椒碱脂质体，并加载于大鼠BMSC进行三维培养，并用茜素红对形成的矿化结节进行染色，最后检测成骨基因ALP的表达。结果：将原代大鼠骨髓间充质干细胞P3代用于体外实验，通过细胞毒性实验确定胡椒碱的最适浓度为50 μM，在处理大鼠BMSC细胞36 h时，对其促增殖作用最为明显（p＜0.001），将该浓度的PIP制备为脂质体作用于成骨诱导的BMSC时，与对照组对比，其促成骨分化作用明显（p＜0.01），且比单独胡椒碱作用时更为显著（p＜0.001）。与此同时，PIP和PL促进大鼠BMSC表达成骨基因ALP的作用显著（p＜0.001）。结论：胡椒碱及胡椒碱脂质体对大鼠骨髓间充质干细胞的促成骨分化作用显著，为后续进行骨缺损动物的修复实验提供了可靠的体外实验数据。

关键词


胡椒碱；脂质体；成骨分化；ALP

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参考


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