基于TGF-β1/Smads信号通路探讨彝药岩龙汤含药血清对大鼠成纤维细胞增殖以及TGF-β1、CTGF表达的影响

张 利新
贵州中医药大学第一附属医院

摘要


目的:基于TGF-β1/Smads信号通路探讨彝药岩龙汤(YLT)含药血清对大鼠成纤维细胞(Fibroblast,FB)增殖以及转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:将40只健康Wistar大鼠随机分为YLT低、中、高剂量实验组(8、16、32g/kg.d)及生理盐水(NaCl)对照组(15ml/kg.d),每组各10只,共灌胃10d,每天2次,于末次灌胃后按照相关实验方法提取大鼠含药与不含药血清;将2只健康Wistar大鼠采用组织块贴壁法进行FB体外原代培养,胰酶联合差速组织块贴壁培养法分离FB;将大鼠结肠FB分为不同浓度(低、中、高)YLT组以及NaCl组,培养24h后取样本,MTT法检测各组大鼠结肠FB增殖抑制率,对4组细胞上清液中TGF-β1含量及细胞中TGF-β1和CTGF的表达水平分别采用ELISA和Western blotting法进行检测。结果:MTT检测结果显示,与YLT低剂量组比较,中、高剂量组对FB的抑制效果明显(P<0.05),在同一时间点呈浓度依赖性;ELISA检测结果显示,与NaCl组比较,YLT各组细胞上清液中TGF-β1含量显著降低(P<0.05);Western blotting检测结果显示,与NaCl组比较,YLT各浓度组细胞中TGF-β1和CTGF的表达水平均有明显下降(P<0.05)。结论:YLT含药血清能抑制大鼠结肠FB增殖,并显著降低细胞中TGF-β1和CTGF的表达,其作用机制与TGF-β1/Smads信号通路有关。

关键词


彝药岩龙汤;TGF-β1;CTGF;成纤维细胞

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