低共熔溶剂法优化葛根蛋白的提取工艺及其美白功效评价

摘要

目的：本研究以葛根为原料，找到采用低共熔溶剂提取葛根蛋白的最佳提取工艺并考察其美白功效。方法：建立考马斯亮蓝测定蛋白含量的方法，考察四种低共熔溶剂确定最佳溶剂的摩尔比浓度，通过单因素试验对温度、时间、料液比三个因素条件进行筛选,再利用正交法根据蛋白得率筛选出最佳提取条件；建立斑马鱼胚胎模型，给与葛根蛋白溶液治疗48h,通过定量分析黑色素光密度对葛根蛋白的美白作用进行评价。结果：葛根蛋白最佳提取工艺条件为低共熔溶剂（氯化胆碱-乳酸）组分摩尔比为1：20、提取温度60℃、提取时间为60min、料液比1:30（g/ml），在此条件下经过三次平行实验得到葛根蛋白得率为1.666%，明显高于传统的提取方法。与空白对照组比较，葛根蛋白浓度为60μg/mL时可显著抑制斑马鱼黑色素生成。结论：本提取工艺既可以促进绿色溶剂对中药提取的发展，又可以降本增效、降低环境污染，并能为葛根的综合利用提供新的思路。